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簡要描述:LeapWal 無血清細(xì)胞凍存液 PZ110R是立譜沃自主研發(fā)的一款無血清、無需程序降溫的細(xì)胞凍存液,廣泛適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的凍存。該凍存液特別優(yōu)化配方含有雙重保護(hù)細(xì)胞的成份,大大提高了細(xì)胞的復(fù)蘇率和活力,成分明確,不含動(dòng)物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞安全。
貨號 PZ110R 供貨周期 現(xiàn)貨 主要用途 細(xì)胞凍存 規(guī)格 100mL
Cell Freezing Medium (1x)
Catalog Number:PZ110R
01/產(chǎn)品概述
細(xì)胞凍存是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境,減少細(xì)胞代謝,以便長期儲存的一種技術(shù),是細(xì)胞長期保存的重要手段。細(xì)胞凍存液通過冷凍保護(hù)劑在凍存過程中對細(xì)胞進(jìn)行保護(hù),以減少或防止冷凍冰晶對細(xì)胞造成的損傷。
LeapWal無血清細(xì)胞凍存液PZ110R是立譜沃生物自主研發(fā)的一款無血清、無需程序降溫的細(xì)胞凍存液,廣泛適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的凍存。該凍存液特別優(yōu)化的配方含有雙重保護(hù)細(xì)胞的成份,從細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外同時(shí)保護(hù)細(xì)胞免受凍存時(shí)冰晶的損傷,大大提高了細(xì)胞的復(fù)蘇率和活力,可用于細(xì)胞長期保存。該產(chǎn)品配方成分明確,不含動(dòng)物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全。
LeapWal 無血清細(xì)胞凍存液 PZ110R與傳統(tǒng)凍存液相比,本產(chǎn)品不僅可以避免使用血清,降低血清中未知成分和病毒等感染物質(zhì)給凍存帶來的影響與風(fēng)險(xiǎn),同時(shí),可省去繁瑣費(fèi)時(shí)的程序降溫過程,細(xì)胞可重懸于本產(chǎn)品后直接置于-80℃冰箱長期保存,或次日轉(zhuǎn)移到液氮完成整個(gè)凍存過程。
02/產(chǎn)品組分
03/保存條件
冰袋(wetice)運(yùn)輸。4℃保存,有效期6個(gè)月。若長期不用,可-30℃至-10℃保存,有效期24個(gè)月。
04/產(chǎn)品特點(diǎn)
1.即用型細(xì)胞凍存液,無需程序降溫,直接凍存于-80℃冰箱,長期保存(>5年)
2.安全性高,無動(dòng)物源性蛋白,不含血清,病毒、病菌和支原體等污染可能性低
3.凍存細(xì)胞復(fù)蘇率高達(dá)90%以上,細(xì)胞活力好
4.成分明確,極大降低批次間差異
05/實(shí)驗(yàn)流程概要
06/實(shí)驗(yàn)步驟
一:細(xì)胞凍存步驟
1.選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,按照常規(guī)方法收集貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞于離心管中。
2.1000rpm-2000rpm,離心5分鐘,收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀,棄上清液。
3.加入適量4℃預(yù)冷的LeapWalCellFreezingMedium(1x)重懸細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。
Ø按照細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存液的量,推薦凍存密度:1x106至5x106cells/mL。
4.將細(xì)胞懸液分裝至已標(biāo)記的凍存管中,建議每管1mL或1.5mL。
5.直接將細(xì)胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中,可長期冷凍保存。如果想放入液氮中長期保存,需先放入-80℃冰箱至少12小時(shí),方可移至液氮罐中長期保存。
二:凍存細(xì)胞復(fù)蘇步驟
1.在15mL離心管中加入5-10mL平衡至室溫的*培養(yǎng)基。
2.從-80℃冰箱/液氮中取出凍存的細(xì)胞,立即放入37℃水浴鍋或其他細(xì)胞復(fù)蘇設(shè)備中,迅速解凍。
3.將凍存管中的細(xì)胞懸液逐滴轉(zhuǎn)移至預(yù)先準(zhǔn)備好的含*培養(yǎng)基的離心管中,1000rpm-1500rpm,離心5分鐘,收集細(xì)胞沉淀,棄上清(操作時(shí)小心,切勿將細(xì)胞沉淀移去)。
4.加入適量平衡至室溫的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,接種到事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)容器中,輕輕搖晃培養(yǎng)容器,使細(xì)胞分布均勻。
5.鏡檢細(xì)胞后,可根據(jù)各自研究的需要和方法經(jīng)行細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)。培養(yǎng)5-24h后,觀察細(xì)胞狀態(tài),可視情況更換新鮮細(xì)胞培養(yǎng)液。
07/適用范圍
LeapWal 無血清細(xì)胞凍存液 PZ110R 廣泛適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的凍存。無需程序降溫,-80℃可長期保存(>5年),細(xì)胞存活率在90%以上。
08/質(zhì)量控制
LeapWal無血清細(xì)胞凍存液均已通過嚴(yán)格的內(nèi)毒素、滲透壓、pH測試和無菌檢測(細(xì)菌、真菌和支原體檢測)。
09/注意事項(xiàng)
1.若長期不用,本產(chǎn)品可-30℃至-10℃保存,再次使用時(shí),請?jiān)?-8℃或室溫(22-25℃,不超過4小時(shí))融化LeapWal Cell Freezing Medium,避免反復(fù)凍融;
2.使用LeapWal Cell Freezing Medium凍存細(xì)胞后,應(yīng)盡量減少凍存細(xì)胞在外存放時(shí)間,盡快移入-80℃超低溫冰箱長期保存;
3.Leap Wal Cell Freezing Medium含有DMSO,部分對DMSO敏感的細(xì)胞、淋巴細(xì)胞或干細(xì)胞凍存,建議使用本產(chǎn)品對其進(jìn)行試驗(yàn)性凍存、復(fù)蘇、培養(yǎng),確認(rèn)性能后再進(jìn)行正式凍存;
4.該產(chǎn)品在室溫條件下放置的時(shí)間不宜過長,以免影響凍存效率;
5.免責(zé)聲明:本公司將不為任何不正當(dāng)使用此產(chǎn)品所發(fā)生的意外負(fù)責(zé);
6.為了您的健康安全,請規(guī)范操作,穿戴實(shí)驗(yàn)服與手套開展實(shí)驗(yàn);
7.本產(chǎn)品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及治療。
10/實(shí)驗(yàn)案例分析
1.選擇處于對數(shù)生長期的四種細(xì)胞,按照常規(guī)方法收集細(xì)胞于離心管中。
2.1000rpm,離心5分鐘,收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀,棄上清液。
3.加入適量4℃預(yù)冷的LeapWalCellFreezingMedium、T公司凍存液、X公司凍存液分別重懸細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。凍存密度為1x106cells/mL。
4.將細(xì)胞懸液分裝至已標(biāo)記的凍存管中,每管1mL,放入-80℃冰箱中,冷凍保存。
5.凍存6個(gè)月后,進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇,對復(fù)蘇后的細(xì)胞進(jìn)行臺盼藍(lán)染色,統(tǒng)計(jì)細(xì)胞存活率。
圖2: 細(xì)胞凍存6個(gè)月后復(fù)蘇,對復(fù)蘇后的細(xì)胞進(jìn)行臺盼藍(lán)染色,統(tǒng)計(jì)細(xì)胞存活率
11/其他相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
LeapWalTM CCK-8 試劑盒 | P11110 | 1 mL |
P11110-F | 1 mL x 5支 | |
LeapWalTM Cell Freezing Medium Plus (1x) | PZ210R | 100 mL |